Reactie van een cirrotische lever op extra hits en bacteriële infecties
NTS-identificatiecode
NTS-BE-912784 v.1, 09-07-2024
Nationale identificatiecode van de NTS
Veld wordt niet gepubliceerd.
Land
België
Taal
nl
Indiening bij EU
Veld wordt niet gepubliceerd.
ja
Duur van het project, uitgedrukt in maanden.
48
Trefwoorden
macrofagen
Translocatie van bacteriën
Regeneratie van de lever
Darm-lever-as
Doel(en) van het project
Fundamenteel onderzoek: Gastro-intestinaal stelsel met inbegrip van de lever
Doelstellingen en verwachte voordelen van het project
Beschrijf de doelstellingen van het project (bijvoorbeeld het aanpakken van bepaalde wetenschappelijke onduidelijkheden, of wetenschappelijke of klinische behoeften).
De doelstellingen van dit project zijn het in kaart brengen van de opname van bacteriën door immuuncellen in een lever met littekens (cirrose) en het visualiseren van de precieze locatie van deze immuuncellen. We willen ook de interactie van immuuncellen en andere cellen visualiseren als reactie op een door laser veroorzaakte schade aan de cirrotische lever
Welke potentiële voordelen kan dit project opleveren? Leg uit hoe de wetenschap vooruit kan worden geholpen of mensen, dieren of het milieu uiteindelijk voordeel kunnen hebben bij het project. Maak, waar van toepassing, een onderscheid tussen voordelen op korte termijn (binnen de looptijd van het project) en voordelen op lange termijn (die mogelijk pas worden bereikt nadat het project is afgerond).
De verwachte voordelen zijn:
• Het begrijpen van het exacte mechanisme van bacteriële klaring bij cirrose levert ons nieuwe informatie op die kan worden gebruikt om verdedigingsstrategieën te formuleren
• Informatie over het regeneratieproces dat wordt georkestreerd door het immuunsysteem bij een cirrotische lever die is blootgesteld aan een acuut letsel zal naar verwachting nieuwe informatie opleveren en ons in staat stellen interventiestrategieën voor dit klinisch relevante probleem te ontwikkelen.
Voorspelde schade
In welke procedures worden de dieren gewoonlijk gebruikt (bijvoorbeeld injecties, chirurgische procedures)? Vermeld het aantal en de duur van deze procedures.
De dieren worden gebruikt in:
• Bij vrijwel alle in dit project aangevraagde dieren (behalve de controlegroep) wordt cirrose geïnduceerd en gedurende 20 weken onder narcose geïnjecteerd met CCL4. De muizen zullen in totaal 21 weken aan het experiment deelnemen (inclusief wash-out-(rust)week)
• Bij muizen wordt onder narcose een kleine operatie uitgevoerd om de darmen bloot te leggen en bacteriële deeltjes in de darmen te injecteren. Meestal duurt dit 1 uur per muis, waarna deze wordt gedood
• In een ander experiment wordt een kleine operatie uitgevoerd om de lever van de muis bloot te leggen voor live beeldvorming. Dit duurt 15 minuten tot 1,5 uur voordat de muizen worden gedood
• Koolstoftetrachloride (CCL4) veroorzaakt ernstige leverschade door een chemische reactie te veroorzaken die de levercellen beschadigt. Na verloop van tijd leidt dit tot littekenvorming in de lever, waardoor deze minder goed functioneert. CCL4 wordt onder de huid in de nek van de muis geïnjecteerd. De injectie wordt tweemaal per week herhaald gedurende 14 weken en 3x per week gedurende de volgende 6 weken.
Wat zijn de verwachte gevolgen/nadelige effecten voor de dieren, bijvoorbeeld pijn, gewichtsverlies, inactiviteit/verminderde mobiliteit, stress, abnormaal gedrag, en wat is de duur van die effecten?
Door de frequente injecties met CCL4 kunnen de dieren kleine wondjes en littekens ontwikkelen
Vermindering van hun gewicht met meer dan 15% of tot minder dan 16 gram is een mogelijkheid.
Algemene pijn en ongemak kunnen worden verwacht als gevolg van de chirurgische ingreep.
Bij subcutane injectie van CCL4 is het mogelijk dat er te diep in het lichaam wordt geinjecteerd of dat er een ader/zenuw geraakt wordt. Dit kan een shocktoestand en een hartstilstand veroorzaken.
Bij het injecteren van anesthetica intraperitoneaal is het mogelijk de darm te beschadigen met de naald of om deze in een ader/zenuw te injecteren, wat een plotselinge shock en de dood kan veroorzaken
Welke soorten en aantallen dieren zullen naar verwachting worden gebruikt? Wat zijn de verwachte ernstgraden en de aantallen dieren in elke ernstcategorie (per soort)?
Soort:
Totaal aantal
Geraamde aantallen naar ernstgraad
Terminaal
Licht
Matig
Ernstig
Muizen (Mus musculus)
326
24
144
0
158
Wat gebeurt er met de dieren die aan het einde van de procedure in leven worden gehouden?
Soort:
Geraamd aantal te hergebruiken, in het habitat-/houderijsysteem terug te plaatsen of voor adoptie vrij te geven dieren
Hergebruikt
Teruggeplaatst
Geadopteerd
Geef de redenen voor het geplande lot van de dieren na de procedure.
Omdat de experimenten zo zijn gepland dat aan het eind het leverweefsel wordt verkregen voor verdere analyse door middel van sequencing en microscopie, kunnen de dieren niet in leven worden gehouden en dus worden ze gedood.
Toepassing van de drie V’s
1. Vervanging
Beschrijf welke diervrije alternatieven op dit gebied voorhanden zijn en waarom zij niet voor het project kunnen worden gebruikt.
Omdat we ernaar streven de translocatie van bacteriën van de darmen naar de lever te bestuderen en hoe ze uiteindelijk worden geklaard in de cirrotische lever en ook het herstel en de regeneratie van een cirrotische lever die is blootgesteld aan een steriele laserbeschadiging, kan dit niet worden gedaan door gebruik te maken van andere alternatieve methoden. De aard van onze onderzoeksvraag dwingt ons ertoe een dierziektemodel te ontwikkelen.
2. Vermindering
Leg uit hoe de aantallen dieren voor dit project zijn bepaald. Beschrijf de stappen die zijn genomen om het aantal te gebruiken dieren te verminderen en de beginselen die zijn gebruikt bij het opzetten van de studies. Beschrijf, waar van toepassing, de praktijken die gedurende het hele project zullen worden toegepast om het aantal dieren die in overeenstemming met de wetenschappelijke doelstellingen werden gebruikt, tot een minimum te beperken. Deze praktijken kunnen bijvoorbeeld bestaan uit proefprojecten, computermodellen, het delen van weefsel en hergebruik.
Het aantal dieren voor dit project werd zorgvuldig bepaald met behulp van statistische analysemodellen en gepubliceerde literatuur.
3. Verfijning
Geef voorbeelden van de specifieke maatregelen (bv. verscherpte monitoring, postoperatieve behandeling, pijnbestrijding, training van dieren) die in verband met de procedures moeten worden genomen om de welzijnskosten (schade) voor de dieren tot een minimum te beperken. Beschrijf de mechanismen om gedurende de looptijd van het project nieuwe verfijningstechnieken in gebruik te nemen.
• De muizen zijn onder narcose en gebruiken isofluraan om irritatie te verminderen wanneer CCL4 onderhuids wordt geïnjecteerd
• De muizen zijn tijdens het experiment waarbij een lus wordt gemaakt in de dunne darm onder narcose gehouden en de lichaamstemperatuur wordt op peil gehouden mbv een verwarmingskussen.
• De muizen worden wekelijks gewogen om het welzijn te garanderen en eventuele afwijkingen op te sporen
Licht de keuze van de soorten en de bijbehorende levensstadia toe
Laboratoriummuizen zijn de soort bij uitstek vanwege de grote verscheidenheid aan voordelen die ze bieden. De kleine omvang, het gemak van manipulatie, de sterke gelijkenis met de menselijke lever, de beschikbaarheid van een grote verscheidenheid aan reportermuizenstammen en voorkennis gebaseerd op de expertise van onze laboratorium en collega's. Bij reportermuizen worden met behulp van een genetische aanpassing de onderzochte cellen fluorescerend. Het beproefde model voor het induceren van levercirrose door toediening van CCL4 bij muizen is een andere motiverende factor om door te gaan met muizen als de soort van keuze voor dit onderzoeksproject.
De leeftijd van ongeveer 8 weken is ideaal, omdat de muizen dan volwassen zijn en ook veerkrachtig genoeg zijn om de wekelijkse toediening van CCL4 te verdragen.
Voor een beoordeling achteraf geselecteerd project
Project geselecteerd voor BA?
ja
Termijn voor BA
14-05-2028
Reden voor de beoordeling achteraf
Bevat ernstige procedures
ja
Maakt gebruik van niet-menselijke primaten
Andere reden
Toelichting van de andere reden voor de beoordeling achteraf
Aanvullende velden
Nationaal veld 1
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 2
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 3
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 4
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 5
Veld wordt niet gepubliceerd.
Startdatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
Einddatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
Goedkeuringsdatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 1
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 2
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 3
Veld wordt niet gepubliceerd.
Link naar de eerdere versie van de NTS buiten het EC-systeem