Weltweit müssen jedes Jahr rund 29 Millionen Menschen nach einer Ansteckung mit dem Tollwutvirus ärztlich behandelt werden und etwa 55 000 Menschen, davon 60 % Kinder, sterben an Tollwut. Vor allem Menschen in Entwicklungs- und Schwellenländern sind von dieser Virusinfektion stark betroffen. Für eine flächendeckende und langfristige Bekämpfung von Tollwut, speziell in diesen Regionen, benötigt es einen effektiven Impfstoff der schnell und unkompliziert hergestellt und gelagert werden kann. Die erfolgreiche Induktion einer schützenden Immunreaktion gegen das Tollwutvirus in Mäusen, mit Hilfe von LC-TDS, bildet die Grundlage für die Entwicklung einer innovativen und schmerzlosen Impfstoffplattform gegen verschiedene virale Erreger. Diese minimal-invasive und schmerzfreie Immunisierungstechnik erfordert eine geringere Antigenmengen und macht die herkömmliche intramuskuläre Verabreichung mit Injektionsnadeln überflüssig. Diese Eigenschaften ermöglichen es grössere Menge des Wirkstoffes bzw. der Impfung innerhalb eines kurzen Zeitraums herzustellt, und gleichzeitig die potenzielle Impfreaktionen und Nebenwirkungen zu verringert und folglich die Akzeptanz gegenüber dieser Impfung in der Bevölkerung zu erhöhen

Wir erwarten, dass die Immunisierung der Tiere mit der RABV-G mRNA eine schützende Immunantwort gegen das Tollwut-Virus in den Tieren induziert. Bei der intradermalen, topischen oder intramuskulären Applikation des Antigens werden die Tiere für kurze Zeit narkotisiert um Stress und mögliche Schmerzen zu minimieren. Die Immunisierung kann zu einer kurzfristigen Impfreaktion führen, z. B. zu einer Reizung der Injektions- bzw. Applikationsstelle und/oder einem vorübergehenden Gewichtsverlust. Es wird jedoch erwartet, dass die Intensität und Dauer dieser Impfreaktionen gering sind. Um die Immunantwort auf zellulärer und humoraler Ebene genau zu analysieren, werden die Tiere am Ende des Immunisierungsversuchs euthanasiert und das Blut und die Organe entnommen.

Alle Tiere werden am Ende der Experimente euthanasiert, um Blut und Organe für weitere Analysen zu entnehmen.

Durch statistische Fallzahlplanung wurde die minimal erforderliche Anzahl der Tiere berechnet, mit denen ein statistisch signifikantes Versuchsergebnis erwartet werden darf. Diese Berechnung hat eine Gruppengrösse von fünf Tieren pro experimentelle Gruppe ergeben (angenomme Parameter für diese Berechnung: Normalverteilung der Datenpunkte, StdAb.: 30%, Analyse mittels einseitige ANOVA bzw. zweiseitige Student’s t-Test, erwartete Difference: halbierung relativ zur jeweiligen Kontrollgruppe, α-Fehler: 0.05.

Alle im Projekt vorgeschlagenen Eingriffe (insbesondere Verabreichung von Antigenen über die Haut) sind sehr gut etabliert und werden von erfahrenen Wissenschaftlern durchgeführt. Um unnötigen Transportstress zu vermeiden, werden alle Eingriffe in den Tierräumen durchgeführt, sofern durch diese Aktivitäten die dort gehaltenen Tiere nicht gestört werden.

Da das LC-TDS ausschließlich von menschlichen Langerhans Zellen (LCs) – über den Zelloberflächenrezeptor Langerin – erkannt wird, müssen wir für dieses Pilotprojekt transgene humane Langerin-DTR (huLang) Mäuse verwenden, auf deren LCs der humane Langerin-Rezeptor exprimiert wird. Transgene huLang Mäuse gelten generell als unbelastete Mauslinie. Eine geringe Belastung dieser Tiere ist demnach ausschließlich durch die experimentellen Eingriffe zu erwarten. Die Experimente werden an adulten Tieren im Alter von 6-8 Wochen durchgeführt die ein vollständig entwickeltes Immunssystem besitzten.