Las caspasa-7 ha sido descrita en otras funciones distintas a la función canónicas de regulación de muerte celular por apoptosis, incluyendo regulación de la respuesta neuroinflamatoría inducida por LPS. Un mayor conocimiento de cómo esta caspasa regule tanto en la enfermedad de Parkinson en la respuesta neuroinflamatoria en microglía puede ser beneficiosa a la hora de encontrar nuevas estrategias terapéuticas (especialmente definiendo sobre qué actúa) para luchar contra la enfermedad de Parkinson.

No hemos observado ningún fenotipo deletéreo en los ratones donde sólo le hemos eliminado la caspasa-7 La acumulación de la alfa sinucleína puede afectar a las funciones motoras y/o cognitivas del animal sobre todo cuando tiene una avanzada edad. En el caso de cirugía estereotáxica, el animal estaría bajo anestesia profunda), se le administraría en las córneas un gel oftálmico para evitar la sequedad durante la cirugía antes de realizar una craneotomía mediante el uso de un pequeño taladro para que posteriormente pudiéramos inyectar mediante la una jeringa Hamilton, el adenovirus a una región específica del cerebro. Tras dicha operación al animal se le administraría un analgésico durante 48-72h (Buprenorfina dosis: 0,05-0,1mg/kg administrado o subcutáneamente o intraperitonealmente).

No aplicable

Para el cálculo del número de animales para este proyecto realizamos un experimento piloto que nos permitió estimar el número necesario de animales para poder observar un efecto de la pérdida de la caspasa-7 en el modelo de la EP . Además, para reducir el número de ratones utilizamos los distintos grupos para hacer varios protocolos experimentales en paralelo (ensayo de comportamiento y estudio inmunohistoquímico del estado de sistema dopaminérgico en los cerebros de dichos ratones).

Todos los experimentos se llevarán a cabo de acuerdo con el «Guidelines of the European Union Council» (2010/63/EU), siguiendo las regulaciones españolas (BOE 34/11370-421, 2013) para el uso de animales de laboratorio. El Comité Ético de Experimentación de la Universidad de Sevilla ha aprobado el presente proyecto. La manipulación de animales vivos se realizará en un estabulario homologado con todos los permisos pertinentes y es sometido a inspecciones periódicas. Utilizaremos los protocolos estándares de supervisión del animalario. En todos los procedimientos experimentales, y especialmente en aquellos de severidad media o alta, debe incluirse un protocolo de supervisión de los animales que permita aplicar medidas paliativas del dolor, como la utilización de analgésicos o el sacrificio por razones humanitarias. Uno de los protocolos más útiles es el propuesto por Morton y Griffiths (Vet. Rec. 116:431-436, 1985). Este protocolo de supervisión permite cuantificar el dolor causado por un procedimiento. Se consideran 5 variables y a cada animal se le asigna una puntuación por variable. Las 5 variables a tener en cuenta son pérdida de peso, aspecto, comportamiento espontáneo, Comportamiento en respuesta a la manipulación y constantes vitales.

Ratones (Mus musculus) a distintos etapas de la vida (adultos y viejos). El sistema nervioso de los ratones presenta una gran semejanza al sistema nervisoso humano. El tipo de procedimiento que quiero utilizar es uno de los modelos más empleados para el estudio de la enfemedad de parkinson. La enfermedad de parkinson ocurre predominantemente en ancianos aunque también se ve en un porcentaje de la población de adultos.