Minskad inflammation för att motverka hjärnskador efter hypoxi-ischemi
Identifierare för PVS
NTS-SE-897712 v.1, 09-01-2025
Nationell identifierare för PVS
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Land
Sverige
Språk
sv
Inlämning till EU
Fältet kommer inte att offentliggöras.
ja
Projektets varaktighet i månader.
60
Nyckelord
perinatal hjärnskada, immunsvar, cellsmodulering
Projektets syfte(n)
Grundforskning: Nervsystemet
Grundforskning: Immunsystemet
Projektets mål och förväntade nytta
Beskriv projektets mål (de vetenskapliga frågorna, eller de vetenskapliga/kliniska behov som ska mötas).
Vi strävar efter att utveckla en ny behandling för att förbättra hypoxisk-ischemisk hjärnskada genom att modulera makrofager/neutrofiler.
Specifika projektmål inkluderar:
a) Karakterisering av tidsmässiga och regionala mönster för makrofager/neutrofiler-aktivering i olika hjärnregioner efter hypoxisk-ischemisk skada i musens hjärna,
b) Undersökning av effekterna av substanser som modulerar inflammatoriska reaktioner (t.ex. läkemedel, cellterapi) på skadeomfattning och beteendemässiga resultat.
Det övergripande målet med den aktuella studien är att undersöka om modulering av den post-ischemisk inflammatoriska responsen hos nyfödda kan förbättra den långsiktiga hjärnutvecklingen.
Vilken nytta kan projektet medföra? Vilka vetenskapliga framsteg kommer att nås, hur kan människor, djur eller miljö i förlängningen dra nytta av projektet. I tillämpliga fall, gör åtskillnad mellan kortsiktig nytta (inom projektets löptid) och långsiktig nytta (som kan uppkomma efter att projektet avslutats).
Årligen drabbas 500 -1000 barn i landet av en hjärnskada som uppstår kring födelsen. De skador som neuropsykiatriska tillstånd, syn- eller hörselskador. Mildare hjärnskador kan leda till nedsatta intellektuella funktioner och skolsvårigheter som upptäcks först i tonåren. Tillväxthämning hos fostret, för tidig födelse (innan vecka 37), infektioner och blödningar i hjärnan är viktiga riskfaktorer, men även assisterad befruktning p. g. a. den ökade risken för flerbörd (27 % tvillingfödslar). Skademekanismerna efter tillfällig syre- och blodbrist (hypoxi-ischemi, HI) i hjärnan är ofullständigt kända. Det är viktigt att betona att hjärnskadan inte uppstår omedelbart, utan utvecklas under timmar till dagar efter HI, vilket visats i både försöksdjur och nyfödda barn som råkat ut för HI (asfyxi). Detta innebär att det finns ett tidsfönster där man kan introducera behandling som
begränsar skadan. Modulering av immunsvaret i detta tidsfönster kan göra det möjligt för oss att lindra inflammation efter skada, minska hjärnskador och förbättra motorisk och kognitiv funktion hos barn.
Skador som kan förutses
Vilka försöksåtgärder kommer djuren vanligtvis att utsättas för (t.ex. injektioner, kirurgiska ingrepp)? Ange försöksåtgärdernas antal och varaktighet.
Hypoxi-Ischemi:
Experimentet omfattar en ligering och en hypoxi, med djuren vilande i 1–2 timmar däremellan. Själva ligeringen tar 5–7 minuter per djur för en erfaren forskare.
Behandling och induktion av knockout:
Djur kommer att genomgå läkemedelsinjektioner eller administrering av cellsubstanser via intraperitoneal (ip), subkutan (sc), intrakranioventrikulär (icv) eller intranasal tillförsel. Varaktigheten är upp till 5 minuter per ip/sc-injektion och upp till 15 minuter per icv- eller intranasal administrering. Procedurerna kan upprepas upp till 8 gånger.
Cyklosporin:
Cyklosporin kommer endast att ges till djur där det är nödvändigt och kan administreras i upp till 4 veckor.
Beteendetester:
Tester inkluderar lokomotionsmätning (Open Field, Rotarod, Beam Walking och gångtest på stege), muskelstyrketest av greppstyrka, analys av gångmönster på löpband, förhöjd pluslabyrint (Elevated Plus Maze) samt tester för objekt- och platsigenkänning. Intellicage och Barnes labyrint ingår också. Frekvens och varaktighet varierar beroende på det specifika testet.
Testerna kan pågå i upp till 2 timmar per dag och upprepas i upp till 10 dagar. Intellicage utgör ett undantag, där testerna kan fortgå under flera veckor. Under denna tid vistas djuren i en berikad miljö.
Avel och identifiering:
Identifiering sker med tuschpenna för valpar och/eller öronmärkning för äldre djur. Förfarandet genomförs en eller maximalt två gånger (inklusive tatuering vid behov).
Vilka typer av påverkan/negativa effekter på djuren kan förutses, till exempel smärta, viktminskning, inaktivitet/nedsatt rörlighet, stress, onormalt beteende, och hur lång är varaktigheten av dessa effekter?
Hypoxi-ischemi: lätt stressade och mindre aktiva valpar; lätt stressade honorna
Administrering av ämnen: lätt stress
Beteendetest: lätt stress
Vilka arter och hur många djur förväntas användas? Vilka är de förväntade svårhetsgraderna och hur många djur omfattas av varje svårhetsgrad (specificera antal per art)?
Arter
Totalt antal
Uppskattat antal per svårhetsgrad
Terminal
Ringa svårhet
Måttlig svårhet
Avsevärd svårhet
Svårhetsgrad på nationell skala
Husmus (Mus musculus)
3000
500
0
2500
0
0
Vad kommer att hända med djuren som hålls vid liv i slutet av försöket?
Arter
Uppskattat antal djur som ska återanvändas, återföras till livsmiljö/djurhållningssystem eller som ska utplaceras
Återanvänds
Återförs
Utplaceras
Ange skälen för djurens planerade öde efter försöket.
Djur kommer att avlivas med godkända metoder, varefter vävnader tas bort. Ett fåtal djur (cirka 500) kommer att användas som organdonatorer, medan majoriteten kommer att ingå i experimentella försök.
Tillämpning av 3R-principen
1. Ersättning
Ange vilka djurfria alternativ som finns tillgängliga på detta område och varför de inte kan användas för projektets ändamål.
Behandling av odlade celler används för att studera effekterna på cellulär nivå. Försök med odlade celler ger mycket värdefull information, men kan inte helt ersätta försök på djur. Ett intakt organ i samspel med hela organismen uppvisar reaktioner som inte kan ses i en cellodling.
2. Begränsning
Förklara hur antalet djur för detta projekt fastställdes. Beskriv vilka åtgärder som har vidtagits för att minska antalet djur som ska användas, och vilka principer som tillämpas för att utforma studier. I förekommande fall, beskriv vilka metoder som kommer att användas i hela projektet för att minimera antalet djur som används, i enlighet med vetenskapliga mål. Dessa metoder kan omfatta exempelvis pilotstudier, datormodellering, gemensamt utnyttjande av vävnader och återanvändning.
Vi har nästan 30 års erfarenhet av HI. Eftersom variationen mellan djuren är stor behövs fler per grupp. De senaste åren har vi konsumerat mellan 300-500 djur per år. Vi ansöker därför om 3 000 möss. För att beräkna antalet djur per grupp planerar vi att använda statistiska verktyg (t.ex. power analys) för att säkerställa att vi har tillräckligt med kraft i våra resultat. En preliminär powerberäkning visar att vi behöver 20 djur per grupp för att upptäcka skillnader i hjärnskador och funktionella utfall. Försöken kommer att äga rum i olika åldrar och djuren kommer att avlivas vid olika tidpunkter.
3. Förfining
Ge exempel på specifika åtgärder (t.ex. ökad övervakning, postoperativ vård, smärtlindring, träning av djur) som kommer att vidtas i samband med försöken för att minimera hälsokostnader (skador) hos djuren. Beskriv mekanismerna för att ta fram nya förfiningstekniker under projektets livstid.
Djuren bedövas under alla kirurgiska ingrepp och lokalbedövningsmedel (smärtstillande) ges i operationssåren. Vi kommer också att tillhandahålla postoperativ övervakning (t.ex. analgetika om det behövs, vikt övervakning, allmäntillståndsövervakning och tillämpa det humana effektmåttet vid behov). Vi kommer också att övervaka djurets vikt efter varje experiment.
Förklara valet av art och de relaterade utvecklingsstadierna
Mus är en av de djurarter som används vid våra djuranläggningar varför den artspecifika utbildningen måste ske i mus.
Vi använder olika utvecklingsstadier baserat på frågan vi ställer, i allmänhet från P10 och äldre, men det kan också vara embryon (sällan).
Projekt valt för utvärdering i efterhand (UE)
Projekt valt för UE?
nej
Tidsfrist för UE
Skäl till utvärdering i efterhand
Inbegriper försök i kategorin avsevärd svårhet
Icke-mänskliga primater används
Annat skäl
Förklaring av annat skäl till utvärdering i efterhand
Kompletterande fält
Nationellt fält 1
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Nationellt fält 2
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Nationellt fält 3
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Nationellt fält 4
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Nationellt fält 5
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Projektets startdatum
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Projektets slutdatum
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Projektets godkännandedatum
Fältet kommer inte att offentliggöras.
ICD-kod 1
Fältet kommer inte att offentliggöras.
ICD-kod 2
Fältet kommer inte att offentliggöras.
ICD-kod 3
Fältet kommer inte att offentliggöras.
Länk till tidigare version av PVS som inte finns i EU-kommissionens system