Pomimo ogromnego postępu medycyny, wciąż istnieje duże zapotrzebowanie na nowe i skuteczne leki w wielu obszarach terapeutycznych. Obecnie brak jest skutecznej terapii na niedobory z AAT1. Terapia mRNA stwarza szansę na skuteczne leczenie niedoborów AAT1. Podanie pacjentom mRNA kodującego AAT1 pozwoliłoby na uzyskanie optymalnego stężenia aktywnej formy AAT1 we krwi. Nadrzędnym celem prowadzonych badań będzie stworzenie leku. Przeprowadzenie badań posłuży przede wszystkim wyborowi najlepszej drogi podania konstruktów mRNA u człowieka. Pozyskane dane będą stanowić wartość intelektualną i zostaną wykorzystane w procedurze ochrony praw patentowych, przyczyniając się do zwiększenia potencjału gospodarczego Wnioskodawcy i kraju.

Chwilowe unieruchomienie podczas podawania preparatów będzie sytuacją stresogenną dla zwierzęcia. Ból przy podawaniu substancji (zastrzyk) i śmierć jako szkoda ostateczna dla zwierząt. Maksymalny czas trwania badań od momentu rozpoczęcia procedur do zakończenia będzie wynosił 14 dni. W czasie trwania procedur zwierzęta będą narażone na działanie podawanych preparatów, mogą się w związku z tym pojawić działania niepożądane, aczkolwiek jest to mało prawdopodobne z uwagi na dobrane dawki oraz charakter podawanych substancji. Wnioskodawca będzie na bieżąco monitorował kondycję zwierząt w celu określenia ich dobrostanu. W przypadku wystąpienia objawów zagrażających życiu zwierząt lub powodujących znaczny dyskomfort nastąpi wcześniejsze humanitarne zakończenie eksperymentu.

Po zakończeniu procedur zwierzęta zostaną uśmiercone w celu pobrania tkanek, które posłużą jako matryce do dalszych badań. Uśmiercenie będzie wykonane zgodnie z obowiązującym prawem poprzez wykrwawienie w znieczuleniu wziewnym, w sposób ograniczający do minimum ból, cierpienie czy stres.

Planowane procedury prowadzimy w sposób umożliwiający wykorzystanie możliwie jak najmniejszej liczby zwierząt niezbędnej do uzyskania istotności statystycznej. Przeprowadzenie badań screeningowych przed przeprowadzeniem badań właściwych pozwoli na ograniczenie liczby zwierząt potrzebnych do przebadania planowanych kompleksów LNP-mRNA. Badania w ośrodku przeprowadza wysoko wykwalifikowana kadra, z wieloletnim doświadczeniem w obszarze badań nad innowacyjnymi terapiami, dzięki czemu zostanie zapewnione właściwe obchodzenie się ze zwierzętami w trakcie eksperymentów i zminimalizuje to ryzyko potrzeby ewentualnego powtórzenia badań oraz użycia dodatkowych zwierząt. Wykorzystywane do badań zwierzęta będą pochodziły z certyfikowanych hodowli prowadzących restrykcyjne programy monitorowania stanu zdrowia i zgodności genetycznej szczepów hodowlanych.

Punktem wyjścia dla rozwijania zasad 3R, w tym zasady udoskonalania, jest zagwarantowanie zwierzętom warunków bytowych zgodnych z obowiązującym prawem (rozporządzenie Ministra Rolnictwa i Rozwoju Wsi z dnia 29 kwietnia 2022 r. w sprawie minimalnych wymagań, jakie powinien spełniać ośrodek, oraz minimalnych wymagań w zakresie opieki nad zwierzętami utrzymywanymi w ośrodku, Dz.U. 2022 poz. 1021). Zawarty w aktach prawnych standard będzie rozwijany i rozszerzany w celu podnoszenia dobrostanu zwierząt i realizacji idei stałego rozwoju m.in. zasady udoskonalania. W związku z powyższym podjęto decyzję o zastosowaniu kilku rodzajów urozmaiceń środowiska w tym samym czasie, co pozwoli na znaczne rozszerzanie zakresu aktywności (w tym możliwości samodzielnego budowania schronień), obniżenie stresu i ułatwienie utrzymania zachowań typowych dla gatunku. Mamy tu przede wszystkim na myśli: mieszanie różnych rodzajów ściółki, wyposażenie klatek w materiał do gniazdowania i drobne przedmioty, takie jak: tunele, domki, drewniane i papierowe elementy. W przypadku zaobserwowania wyraźnych preferencji dla konkretnych rozwiązań/urozmaiceń będą one wdrażane na stałe w danej grupie zwierząt, a mniej preferowane - wycofywane.

Badania przeprowadzone zostaną na myszach domowych szczepu wsobnego BALB/c pochodzących z certyfikowanych hodowli prowadzących restrykcyjne programy monitorowania stanu zdrowia i zgodności genetycznej stad hodowlanych. Badanie farmakokinetyczne w modelu mysim jest standardowo wykorzystywanym modelem zwierzęcym umożlwiającym wybór najlepszych kandydatów na lek. Do badań wykorzystane zostaną osobniki w wieku około 7-8 tygodni, o masie ciała w przedziale 20-25 gramów.