Onderzoek naar de rol van AXL bij paracetamol-geïnduceerde leverbeschadiging
NTS-identificatiecode
NTS-BE-634341 v.1, 01-06-2022
Nationale identificatiecode van de NTS
Veld wordt niet gepubliceerd.
Land
België
Taal
nl
Indiening bij EU
Veld wordt niet gepubliceerd.
ja
Duur van het project, uitgedrukt in maanden.
60
Trefwoorden
leverschade
macrofagen
paracetamol
Doel(en) van het project
Fundamenteel onderzoek: Immuunstelsel
Doelstellingen en verwachte voordelen van het project
Beschrijf de doelstellingen van het project (bijvoorbeeld het aanpakken van bepaalde wetenschappelijke onduidelijkheden, of wetenschappelijke of klinische behoeften).
Paracetamol (acetaminophen) overdosis is de belangrijkste oorzaak van acuut leverfalen in de Westerse wereld, maar desondanks is er weinig geweten omtrent de pathogenese van paracetamol overdosis. Kupffer cellen zijn de macrofagen van de lever en zijn gelokaliseerd in de bloedbaan van de sinusoïden. Deze cellen brengen een gepaste immuunreactie op gang wanneer een potentieel pathogeen binnendringt of wanneer er weefselschade optreedt. Door het gebrek aan specifieke tools is de studie omtrent deze cellen echter beperkt. In deze studie zullen we aan de hand van enkele nieuwe KC-specifieke tools de rol van deze voorname cellen onderzoeken in een muis model voor paracetamol overdosis
Welke potentiële voordelen kan dit project opleveren? Leg uit hoe de wetenschap vooruit kan worden geholpen of mensen, dieren of het milieu uiteindelijk voordeel kunnen hebben bij het project. Maak, waar van toepassing, een onderscheid tussen voordelen op korte termijn (binnen de looptijd van het project) en voordelen op lange termijn (die mogelijk pas worden bereikt nadat het project is afgerond).
Inzicht in de rol van Kupffer cellen in paracetamol overdosis zou kunnen bijdragen tot het ontwikkelen van nieuwe therapeutische interventies.
Voorspelde schade
In welke procedures worden de dieren gewoonlijk gebruikt (bijvoorbeeld injecties, chirurgische procedures)? Vermeld het aantal en de duur van deze procedures.
Muizen krijgen een overdosis paracetamol via orale toediening na een nacht zonder voeding. Daarna zullen muizen nauwlettend worden gecontroleerd op tekenen van onnodig lijden. In de loop van de experimenten zullen muizen ook dagelijks worden behandeld met AXL-remmer (of vehikelcontrole) via orale toediening. Muizen worden gedood en organen worden 24, 48, 72 en 96 uur na de toediening van de overdosis paracetamol afgenomen.
Wat zijn de verwachte gevolgen/nadelige effecten voor de dieren, bijvoorbeeld pijn, gewichtsverlies, inactiviteit/verminderde mobiliteit, stress, abnormaal gedrag, en wat is de duur van die effecten?
Na toediening van paracetamol ervaren de muizen gedurende 12 tot 24 uur matige pijn (120 muizen), waarna ze volledig herstellen. Gedurende deze tijd worden ze nauwlettend gevolgd en als er pijn wordt waargenomen, worden ze geëuthanaseerd door cervicale dislocatie of CO2. Na de aangegeven tijden voor elk experiment worden de muizen gedood met behulp van CO2 en worden hun levers en bloed verzameld voor verdere analyse.
Welke soorten en aantallen dieren zullen naar verwachting worden gebruikt? Wat zijn de verwachte ernstgraden en de aantallen dieren in elke ernstcategorie (per soort)?
Soort:
Totaal aantal
Geraamde aantallen naar ernstgraad
Terminaal
Licht
Matig
Ernstig
Muizen (Mus musculus)
120
0
0
120
0
Wat gebeurt er met de dieren die aan het einde van de procedure in leven worden gehouden?
Soort:
Geraamd aantal te hergebruiken, in het habitat-/houderijsysteem terug te plaatsen of voor adoptie vrij te geven dieren
Hergebruikt
Teruggeplaatst
Geadopteerd
Geef de redenen voor het geplande lot van de dieren na de procedure.
Na de inductie van paracetamol-overdosis, zullen alle muizen worden opgeofferd om de progressie van leverbeschadiging te onderzoeken.
Toepassing van de drie V’s
1. Vervanging
Beschrijf welke diervrije alternatieven op dit gebied voorhanden zijn en waarom zij niet voor het project kunnen worden gebruikt.
Helaas hebben we voor deze experimenten geen alternatief voor het muismodel, omdat we de complexe interacties tussen de levermacrofagen, gerekruteerde cellen uit het bloed en de andere levercellen in vitro niet kunnen modelleren. We proberen de interacties tussen deze cellen beter te begrijpen om ze op een dag in vitro te kunnen bestuderen, maar er is nog een lange weg te gaan.
2. Vermindering
Leg uit hoe de aantallen dieren voor dit project zijn bepaald. Beschrijf de stappen die zijn genomen om het aantal te gebruiken dieren te verminderen en de beginselen die zijn gebruikt bij het opzetten van de studies. Beschrijf, waar van toepassing, de praktijken die gedurende het hele project zullen worden toegepast om het aantal dieren die in overeenstemming met de wetenschappelijke doelstellingen werden gebruikt, tot een minimum te beperken. Deze praktijken kunnen bijvoorbeeld bestaan uit proefprojecten, computermodellen, het delen van weefsel en hergebruik.
Het aantal gewenste muizen is gebaseerd op onze ervaring aan de hand van het minimum aantal muizen dat nodig is om statistisch relevante resultaten op te leveren. De beschreven protocollen zijn daarenboven al vaak gebruikt in het labo en door een groep in Brussel waar we nauw mee samenwerken.
3. Verfijning
Geef voorbeelden van de specifieke maatregelen (bv. verscherpte monitoring, postoperatieve behandeling, pijnbestrijding, training van dieren) die in verband met de procedures moeten worden genomen om de welzijnskosten (schade) voor de dieren tot een minimum te beperken. Beschrijf de mechanismen om gedurende de looptijd van het project nieuwe verfijningstechnieken in gebruik te nemen.
Muizen zullen gebruikt worden omdat we beschikken over alle protocols om dit uit te voeren op muizen en omdat we reeds grote expertise hebben in de studie van muis macrofagen. De protocols zijn ook reeds geoptimaliseerd door onze onderzoekspartners om minimaal ongemak en pijn te induceren bij de muizen. Werken met muizen is dus de beste keuze om deze wetenschappelijk vraag te beanwtwoorden omdat we dit kunnen doen met reeds gevalideerde protocollen die minimaal ongemak induceren.
Licht de keuze van de soorten en de bijbehorende levensstadia toe
De fysiologie van muizen en hun soort immuun respons ligt dicht genoeg bij die van mensen om muizen te gebruiken als onderzoeksmodel om de mechanismen te begrijpen die ten grondslag liggen aan de regulatie van het immuunsysteem bij beide soorten en om waardevolle informatie te verkrijgen met mogelijke klinische toepassingen. Bovendien maken de grootte, de snelheid van de reproductiecyclus, onze brede kennis van muisgenetica en ons vermogen om het muizengenoom genetisch te modificeren muizen de meest geschikte soort voor dit onderzoeksproject.
Voor een beoordeling achteraf geselecteerd project
Project geselecteerd voor BA?
ja
Termijn voor BA
30-04-2027
Reden voor de beoordeling achteraf
Bevat ernstige procedures
Maakt gebruik van niet-menselijke primaten
Andere reden
ja
Toelichting van de andere reden voor de beoordeling achteraf
Wettelijk verplicht
Aanvullende velden
Nationaal veld 1
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 2
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 3
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 4
Veld wordt niet gepubliceerd.
Nationaal veld 5
Veld wordt niet gepubliceerd.
Startdatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
Einddatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
Goedkeuringsdatum project
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 1
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 2
Veld wordt niet gepubliceerd.
ICD-code 3
Veld wordt niet gepubliceerd.
Link naar de eerdere versie van de NTS buiten het EC-systeem