W ramach tego projektu zostanie zbadane, 1) jak SLPI wpływa na napływ neutrofili do skóry łuszczycowej, 2) które subpopulacje neutrofili napływają do skóry łuszczycowej w sposób preferencyjny oraz 3) jaka jest rola białka SLPI w procesie dojrzewania neutrofili w szpiku kostnym. Realizacja tego projektu pozwoli nam na poznanie zjawisk leżących u podstaw rozwoju zmian łuszczycowych i przyczyni się do lepszego zrozumienia patogenezy łuszczycy.

Przewidywane szkodliwe skutki dla zwierząt to lokalny stan zapalny w miejscu aplikacji kremu, którego substancją czynną jest imikwimod. Po zakończeniu eksperymentu zwierzęta zostaną poddane humanitarnemu uśmierceniu.

Ze wszystkich zwierząt po uśmierceniu zostaną pobrane tkanki, które następnie zostaną wykorzystane do dalszych analiz: analizy ekspresji genów, analizy ekspresji białek, analizy populacji komórek immunologicznych, analizy aktywności enzymatycznej.

W celu zapewnienia jednorodności próby oraz jej minimalizacji, do doświadczenia dobrane zostaną zwierzęta w podobnym wieku i o zbliżonej masie ciała. W metodach doświadczalnych zostaną wykorzystane grupy zwierząt z odpowiednią liczebnością wymaganą do analizy statystycznej, która została ograniczona do poziomu niezbędnego do osiągnięcia wyników statystycznie istotnych. Proponowane procedury w przedstawionym wniosku są łatwe do wykonania i szeroko opisane w literaturze, a eksperymentatorzy dedykowani do ich wykonania dysponują wieloletnim doświadczeniem w pracy z modelami mysimi, co zdecydowanie wpływa na ograniczenie liczby myszy potrzebnych do wykonania proponowanych doświadczeń.

Zwierzęta będą utrzymywane w warunkach odpowiednich dla ich gatunku, z nieograniczonym dostępem do wody i pożywienia, niezmiennym cyklem dostępności światła (14h/10h) oraz w stałej temperaturze. Klatki, poza ściółką, zawierać będą wzbogacenia w postaci gryzaków. Przed rozpoczęciem doświadczeń, myszy będą oswajane z eksperymentatorem oraz przyzwyczajane do technik eksperymentalnych. Eksperymentatorzy posiadają już niezbędne doświadczenie w pracy z mysimi modelami, co pozwoli na szybkie i sprawne przeprowadzenie procedur. Metody badawcze zastosowane w procedurach zostały dobrane tak, aby ograniczały do minimum albo eliminowały ból, cierpienie, stres lub możliwość trwałego uszkodzenia organizmu zwierząt.

Wybór gatunku, na którym będą przeprowadzane badania wynika z faktu, iż zaproponowane doświadczenia dotyczą roli neutrofili w patogenezie łuszczycy i stanowią logiczną kontynuację naszych dotychczasowych badań. Ponadto, zaproponowane przez nas procedury są dobrze opisane i opracowane na gatunku myszy domowej. W eksperymentach zostaną wykorzystane myszy w wieku od 8 do 12 tygodni.