Expérience à refaire (expérience 2/23-58): Utilisation de vésicules extracellulaires issues de cellules souches dentaires en tant que système de délivrance de molécules pour les maladies neurologiques
Identifiant du RNT
NTS-BE-486327 v.1, 16-01-2025
Identifiant national du RNT
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Pays
Belgique
Langue
fr
Soumission à l’UE
Ce champ ne sera pas publié.
oui
Durée du projet exprimée en mois.
12
Mots-clés
remyélinisation
vésicules extracellulaires
Biodistribution
Sclérose en plaques
Neuroinflammation
Finalité(s) du projet
Recherche translationnelle et appliquée: Troubles nerveux et mentaux chez l’homme
Objectifs et bénéfices escomptés du projet
Décrire les objectifs du projet (par exemple, répondre à certaines interrogations scientifiques ou à des besoins scientifiques ou cliniques).
L’objectif principal de ce projet est de développer un médicament capable de favoriser la régénération de la myéline afin de réparer les dommages causés par la sclérose en plaques. Notre stratégie consistera à administrer une molécule encapsulée dans les vésicules extracellulaires (vésicules produites par les cellules) issues de cellules souches. Cette étude nous permettra de tester l’efficacité de notre formulation dans un modèle plus simple de lesion de la myeline (au regard de l’induction de la lésion et de la voie d’administration) avant de la tester dans des modèles plus complexes de sclérose en plaques.
Quels sont les bénéfices susceptibles de découler de ce projet? Expliquer en quoi le projet pourrait faire progresser les connaissances scientifiques ou quels bénéfices les êtres humains, les animaux ou l’environnement pourraient en tirer à terme. Le cas échéant, distinguer les bénéfices à court terme (pendant la durée du projet) et les bénéfices à long terme (susceptibles d’être obtenus après l’achèvement du projet).
Les traitements actuels de la sclérose en plaques se concentrent sur la réduction de l’inflammation mais aucun ne permet une remyélinisation. Ceci s’explique principalement par la difficulté qu’ont les traitements actuels à franchir la barrière hémato-encéphalique. Notre hypothèse est que la combinaison des vésicules extracellulaires et d’une molécule active, le siponimod, pourrait réduire l’inflammation grâce à l’action des vésicules . Le siponimod est une molécule déjà commercialisée pour ses propriétés systémiques sur la réduction de l’inflammation mais non pour ses effets sur la remyélinisation. De plus, l’utilisation des vésicules extracellulaires pour le traitement de maladies du système nerveux est un domaine en pleine expansion. L’objectif ultime du projet est de trouver de nouveaux traitements pour la sclérose en plaques en développant des nouvelles stratégies pour amener les médicaments au cerveau.
Nuisances prévues
À quelles procédures les animaux seront-ils soumis en règle générale (par exemple, injections, procédures chirurgicales)? Indiquer le nombre et la durée de ces procédures.
Les animaux seront anesthésiés par injection sous-cutanée de ketamine/xylazine et analgésiés par injection sous-cutanée de lidocaïne. Une première intervention consistera à administrer la lysolécithine dans le corps calleux des souris. Pour cela, une manipulation de la boîte crânienne sera effectué. Trois jours plus tard, une seconde intervention aura lieu. Elle consistera à administrer le traitement dans le ventricule cérébral droit des souris.
Quels sont les effets/effets indésirables prévus sur les animaux, par exemple, douleur, perte de poids, inactivité/mobilité réduite, stress, comportement anormal, et la durée de ces effets?
Une première étude in vitro a été menée sur des cellules nerveuses. On a pu constater que nos formulations n'étaient pas toxiques sur les cellules. De même, une étude in vitro menée sur des cellules murines n'a pas montré de toxicité de nos formulations. Enfin, aucun effet visible sur le comportement des souris n'a été répertorié.
Quelles espèces et combien d’animaux est-il prévu d’utiliser? Quels sont le degré de gravité des procédures et le nombre d’animaux prévus dans chaque catégorie de gravité (par espèce)?
Espèce
Nombre total
Nombre estimé par degré de gravité
Sans réveil
Légère
Modérée
Sévère
Souris (Mus musculus)
55
0
0
55
0
Qu’adviendra-t-il des animaux maintenus en vie à la fin de la procédure?
Espèce
Nombre estimé d’animaux à réutiliser, à replacer dans l’habitat/le système d’élevage ou à proposer à l’adoption
Réutilisé
Replacé dans l’habitat naturel ou le système d’élevage
Proposé à l’adoption
Justifier le sort prévu des animaux à l’issue de la procédure.
L'animal sera euthanasié afin de pouvoir faire des prélèvements et des analyses tissulaires.
Application de la règle des «trois R»
1. Remplacement
Indiquer quelles sont les alternatives non animales disponibles dans ce domaine et pourquoi elles ne peuvent pas être utilisées aux fins du projet.
Des études in vitro ont été menées sur des cellules nerveuses. Elles ont permis de montrer une diminution de l'expression de certains marqueurs inflammatoires ainsi qu'une augmentation de l'expression de marqueurs de différenciation des cellules. Cependant, le cerveau est un environnement complexe ne pouvant être uniquement mimé par des cultures cellulaires. C'est pourquoi une étude in vivo afin de montrer l'efficacité de nos formulations est nécessaire.
2. Réduction
Expliquer comment le nombre d’animaux prévu pour ce projet a été déterminé. Décrire les mesures prises pour réduire le nombre d’animaux à utiliser et les principes appliqués pour concevoir les études. S’il y a lieu, décrire les pratiques qui seront appliquées tout au long du projet pour limiter le plus possible le nombre d’animaux utilisés sans perdre de vue les objectifs scientifiques. Ces pratiques peuvent notamment consister en études pilotes, modélisation informatique, partage et réutilisation des tissus.
Le nombre d'animaux a été statistiquement déterminé afin que ce nombre soit nécessaire et suffisant pour observer des effets statistiquement relevants.
3. Raffinement
Donner des exemples des mesures spécifiques qui seront prises (par exemple, surveillance accrue, soins postopératoires, gestion de la douleur, entraînement des animaux) pour réduire au minimum les effets sur le bien-être des animaux (les nuisances causées). Décrire les mécanismes permettant d’intégrer de nouvelles techniques de raffinement pendant la durée de vie du projet.
L'injection de la lysolécithine et celle du traitement seront faites après sédation par kétamine / xylazine et analgésie par Lidocaïne.
Le poids de l'animal et son état général seront suivi tout au long de l'expérience.
Expliquer le choix des espèces et les stades de développement y afférents
La souris est le modèle le plus utilisé et son génome est séquencé. Les souris C57BL/6 sont les plus utiliées pour les modèles de sclérose en plaques.
Projet retenu pour une appréciation rétrospective
Projet retenu pour AR?
oui
Délai pour AR
18-12-2025
Raisons de l’appréciation rétrospective
Prévoit des procédures sévères
Utilise des primates non humains
Autre raison
oui
Explication de l’autre raison de l’appréciation rétrospective
Douleurs modérées
Champs supplémentaires
Champ national 1
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Champ national 2
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Champ national 3
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Champ national 4
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Champ national 5
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Date de début du projet
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Date de fin du projet
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Date d’approbation du projet
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Code CIM 1
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Code CIM 2
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Code CIM 3
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Lien vers la version précédente du RNT en dehors du système CE