El descubrimiento de un biomarcador que permitirá determinar con exactitud el tiempo del inicio del ictus, lo cual incrementará el porcetaje de pacientes candidatos para las terapias trombolíticas y endovasculares.

El grado de severidad de este proyecto será moderado. Podrían aparecer algunos efectos adversos secundarios a la cirugía o derivados de la lesión isquémica. No se esperan efectos secundarios debidos a la administración del fármaco. Si la severidad de los procedimientos se incrementa o se ve comprometido el bienestar de los animales, se tomarán las medidas adecuadas para reducir el sufrimiento o daño.

Al final de cada procedimiento, los animales serán sacrificados siguiendo un método adecuado para la especie según la legislación vigente (Anexo III, RD 53/2013) para la obtención y análisis de los tejidos.

Se intentará, en la medida de lo posible, utilizar protocolos ya establecidos en la bibliografía, que sean ampliamente utilizados y estandarizados y que sean técnicas de rutina en el laboratorio. De esta forma se intenta reducir el uso de animales extra como consecuencia de la puesta a punto de los protocolos experimentales. Además, el uso de la resonancia magnética permite el seguimiento continuado de un mismo animal, por lo que no es necesario sacrificar múltiples animales a diferentes puntos temporales para poder estudiar la evolución de la patología. De la misma manera, tal y como se demostró en estudios previos realizados en nuestro laboratorio, los criterios de exclusión basados en parámetros de resonancia magnética permiten mejorar la reproducibilidad de las técnicas, lo que da lugar a una mayor potencia estadística y una reducción de la n. Por último, se realizó un análisis de poder utilizando el software EPIDAT, con una poder de 0,8 y una alfa de 0,05.

Siempre que sea posible, los estudios se llevarán a cabo con protocolos ampliamente utilizados y estandarizados, con el fin de evitar complicaciones innecesarias que puedan suponer un sufrimiento extra para el animal. De la misma manera, todos los procedimientos que no exijan de forma ineludible que el animal esté despierto serán llevados a cabo bajo anestesia general (sevoflurano) y se utilizará un analgésico tópico para reducir el dolor en el animal. Además, los animales serán mantenidos en jaulas individuales con una humedad (60%) y temperatura (22ºC) constante y tendrán acceso a agua y comida ad libitum.

Los roedores son un modelo animal ampliamente utilizado en la investigación en isquémias cerebrales ya que permiten obtener gran cantidad de información sobre funciones biológicas en el menor periodo de tiempo. De esta forma se optimiza el proceso con el objetivo de adquirir el máximo conocimiento posible con el menor número de animales y tiempo. Por otro lado, aunque ningún modelo animal asemeja completamente la patología que se produce en el ser humano, los modelos animales seleccionados en el presente estudio presentan importantes similitudes que permitirán extrapolar los resultados obtenidos a los seres humanos.