NON-TECHNICAL PROJECT SUMMARY
Title of the project
Transplantasjon av kjønnsceller til voksne sterile laks
NTS Identifier
NTS-NO-056919 v.1, 23-09-2024
NTS National Identifier
Field will not be published.
Country
Norway
Language
en
EU Submission
Field will not be published.
Yes
Project duration expressed in months.
16
Keywords
fish host
germ cell transplantation
Injeksjon
Reproduction
Transplantation
Purpose(s) of the project
Basic research: Urogenital/Reproductive System
Objectives and predicted benefits of the project
Describe the objectives of the project (for example, addressing certain scientific unknowns, or scientific or clinical needs).
Ved surrogati i fisk er det vanlig å bruke nyklekkede embryoer som surrogater. Imidlertid tar dette veldig lang tid i laks fordi utviklingen i laks tar så lang tid. For å korte ned denne tiden har man i andre fiskearter transplantert inn kjønnsceller i voksne fisk. Vi vil gjerne utprøve slik metodologi i laks, som tidligere har fungert i noen andre teleoster (se referanser nedenfor), med mål om å forkorte generasjonstiden i laks. Denne tilnærmingen vil bli testet ved å transplantere laks-donorkjønnsceller inn i sterile, GCF dnd-KO voksne enten via injeksjon i kroppshulen (hanner og hunner) eller via urogenitalpapillen (hos hanner). Vi vil bruke disse to metodene siden det er slik det er rapportert for andre fiskearter. For å øke nøyaktigheten av injeksjonen vil vi bruke ultralyd under injeksjon. Sperm eller egg vil bli samlet fra alle gytende individer og krysset ut for å undersøke gametkvalitet og suksess av surrogatien. Relevante referanser Lacerda SM, Batlouni SR, Costa GM, Segatelli TM, Quirino BR, Queiroz BM, Kalapothakis E, França LR. A new and fast technique to generate offspring after germ cells transplantation in adult fish: the Nile tilapia (Oreochromis niloticus) model. PLoS One. 2010 May 20;5(5):e10740. doi: 10.1371/journal.pone.0010740. PMID: 20505774; PMCID: PMC2873995. Dongdong Xu, Tasuku Yoshino, Junpei Konishi, Hiroyuki Yoshikawa, Yasuko Ino, Ryosuke Yazawa, Samyra Maria dos Santos Nassif Lacerda, Luiz Renato de França, Yutaka Takeuchi, Germ cell-less hybrid fish: ideal recipient for spermatogonial transplantation for the rapid production of donor-derived sperm, Biology of Reproduction, Volume 101, Issue 2, August 2019, Pages 492–500, https://doi.org/10.1093/biolre/ioz045 Rosa, I.F.; Martinez, E.R.M.; Digmayer, M.; Doretto, L.B.; Nóbrega, R.H. Successful Cryopreservation of Spermatogonia Stem Cells of Neotropical Catfish (Rhamdia quelen) and Enriched Germ Cell Transplantation into Common Carp (Cyprinus carpio) Testes. Fishes 2023, 8, 478. https://doi.org/10.3390/fishes8100478
What are the potential benefits likely to derive from this project? Explain how science could be advanced, or humans, animals or environment may ultimately benefit from the project. Where applicable, differentiate between short-term benefits (within the duration of the project) and long-term benefits (which may accrue after the project is finished).
Avl av laks og introduksjon av nye genotyper er veldig krevende og tar lang tid. Ved hjelp av in vitro-kultivering av kjønnsceller kan man muligens i fremtiden gjøre noe av avlen "in vitro". I tillegg til dette kan man bruke sterile surrogater for å oppskalere produksjonen av nye genotyper. Denne prosessen er tidskrevende fordi man bruker nyklekkede embryoer som surrogater. Imidlertid har man hos andre arter av fisk brukt voksne surrogater og kan dermed redusere generasjonstiden. I dette forsøket vil vi for første gang i laks, prøve å bruke sterile voksne som surrogater for kjønnsceller, og håper dermed å få kortet ned generasjonstiden i laks.
Predicted harms
In what procedures will the animals typically be used (for example, injections, surgical procedures)? Indicate the number and duration of these procedures.
Ved transplantasjon sederes fisken med Finquel. Hver fisk injiseres med en nål som inneholder opptil 1 ml kjønnscelleløsning. Vi vil sedere én fisk om gangen. Etterpå overføres fisken til et 2 m kar for oppvåkning. Fisken overvåkes tett etter behandlingen for å se at fiskens velferd ikke har blitt påvirket av behandlingen.
What are the expected impacts/adverse effects on the animals, for example pain, weight loss, inactivity/reduced mobility, stress, abnormal behaviour, and the duration of those effects?
Vi vil bruke tynne nåler ved injeksjon av kjønnsceller, det er ikke forventet at dyrene vil lide på grunn av transplatasjonen.
What species and numbers of animals are expected to be used? What are the expected severities and the numbers of animals in each severity category (per species)?
Species
Total number
Estimated numbers per severity
Non recovery
Mild
Moderate
Severe
Salmon, trout, chars and graylings (Salmonidae)
75
0
75
0
0
What will happen to the animals kept alive at the end of the procedure?
Species
Estimated numbers of animals to be reused, to be returned to habitat/husbandry system or to be rehomed
Reused
Returned
Rehomed
Please provide reasons for the planned fate of the animals after the procedure.
Vi vil beholde alle surrogatene frem til de kjønnsmodner, slik at vi kan bruke sperm i fertiliseringer for en ny generasjon. Fisk som har fått avkom eller fortsatt er sterile, vil bli avlivet.
Application of the Three Rs
1. Replacement
State which non-animal alternatives are available in this field and why they cannot be used for the purposes of the project.
Surrogatene må være levende laks hvis vi skal få teste om de kan bære kjønnsceller. Det finnes derfor ingen erstatning, men vi vil bruke så få fisk som mulig for å likevel kunne publisere resultatene.
2. Reduction
Explain how the numbers of animals for this project were determined. Describe steps that have been taken to reduce the number of animals to be used, and principles used to design studies. Where applicable, describe practices that will be used throughout the project to minimise the number of animals used consistent with scientific objectives. Those practices may include e.g. pilot studies, computer modelling, sharing of tissue and reuse.
Vi vil bruke så få som mulig av surrogater men alikevel ha så mange at vi kan få et statistiskt godt underlag for en publikasjon.
3. Refinement
Give examples of the specific measures (e.g., increased monitoring, post-operative care, pain management, training of animals) to be taken, in relation to the procedures, to minimise welfare costs (harms) to the animals. Describe the mechanisms to take up emerging refinement techniques during the lifetime of the project.
Vi vil først teste ut effektivitet ved injeksjon med hjelp av fargestoff, dette vil redusere antall dyr i forsøk.
Explain the choice of species and the related life stages.
Vi har planlagt et vekst- og velferdsforsøk på kjønnscellefri laks i merd. Dessverre ble forsøket ikke godkjent av miljømyndighetene fordi de mente at det var for lite kunnskap knyttet til forsøket for å utelukke en risiko for miljøet. Vi har derfor 150 tre år gamle kjønnscellefrie laks som vi vil kjøre forsøk på. 75 av disse fiskene vil bli brukt i dette forsøket som voksne surrogater.
Project selected for Retrospective Assessment
Project selected for RA?
No
Deadline for RA
Reasons for retrospective assessment
Contains severe procedures
Uses non-human primates
Other reason
Explanation of the other reason for retrospective assessment
Additional fields
National field 1
Field will not be published.
National field 2
Field will not be published.
National field 3
Field will not be published.
National field 4
Field will not be published.
National field 5
Field will not be published.
Project start date
Field will not be published.
Project end date
Field will not be published.
Project approval date
Field will not be published.
ICD code 1
Field will not be published.
ICD code 2
Field will not be published.
ICD code 3
Field will not be published.
Link to the previous NTS version outside the EC system